反义寡核苷酸与谢谢
一、反义寡核苷酸与谢谢
反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide)通常指进行了某些化学修饰的短链核酸(约15-25个核苷酸组成),它的碱基顺序排列与特定的靶标RNA序列互补,进入细胞后可按照Watson-Crick碱基互补配对的原则与靶标序列形成双链结构。反义寡核苷酸与靶标基因的RNA结合后可通过各种不同的机制影响靶标基因的表达。
反义寡核苷酸可用于基因沉默,所以是一种研究基因功能的重要工具。大多数药物属于靶标基因(或疾病基因)的抑制剂,因此反义寡核苷酸模拟了药物的作用,这功能丢失(LOF)的研究方法比传统的功能获得(GOF)方法更具优势。同时,那些在靶标实验中证明有效的反义寡核苷酸本身还可以被进一步开发成为反义寡核苷酸药物。
顺式诱饵寡核苷酸应该是翻译过来的~很少听过!
我猜可能跟引物类似吧~
二、什么是反义药物
你好,反义药物又称反义寡核苷酸药物,是指人工合成长度为10~30个碱
基的DNA分子及其类似物。根据核苷酸杂交原理,反义药物能与特定的
基因杂交,在基因水平上干扰致病蛋白质的产生过程。蛋白质在人体代
谢过程中扮演重要角色,大多数疾病都是由于蛋白质异常引起的,无论
肿瘤、心血管疾病或传染性疾病,传统药物主要直接作用于致病蛋白质
本身,反义药物则作用于产生蛋白质的基因,因此可广泛应用于各种疾
病的治疗,比传统药物更具选择性,而且具有高效低毒、用量少等特点。
几年前,由于反义药物合成价格昂贵,使该类药物难以进行广泛的
临床试验。近年来,由于合成技术的改进和合成仪器的研制成功,反义
药物的成本已大为降低,从而加速了反义药物的研究与开发。
药动学由于体内各器官组织存在核酸酶,因此天然的寡核苷酸进入
体内极易被分解失活,故反义药物多以修饰寡核苷酸为主,以增强其抗
核酸酶降解的作用。寡核苷酸的修饰方法有多种,常用硫代寡核苷酸,
因为该反义药物具有良好的水溶性,易大量合成,能满足临床所需。采
用皮下、肌肉和静脉注射方法给药,除脑组织外,可分布于各器官和组
织中,能与血浆蛋白结合,但亲和力较低,主要从尿中排出。
17例健康志愿试验者,静注硫代寡核苷酸0.05~0.25微克/千克,
连用10天,血药浓度210~280微克/升,24小时达稳态血药浓度,血浆
峰值浓度295.8微克/升。硫代寡核苷酸口服生物利用度极低(<5%),
易在肠内降解失活,因此宜采用静注或肌注方法。
临床应用目前有17种反义寡核苷酸药物进入临床试验,其中有一种
(Vitravene)已上市。17例白血病患者,用反义寡核苷酸治疗,每日
皮下注射1次,每次0.1微克/千克,连用6周,部分患者病情稳定,食
欲增加,症状改善,有效率为40%。另外有5例白血病患者,用白消胺
和环磷酰胺治疗无效,改用反义寡核苷酸治疗,连用8周,结果有一例
血液指标恢复正常,其余4例存活1~2年。
9例顽固性非何杰金淋巴瘤患者,用反义寡核苷酸治疗、每日肌注
0.2微克/千克,连用4周,结果2例肿瘤缩小,2例血液中肿瘤细胞减少,
6例症状改善。
Vitravene是1998年经FDA批准进入市场的反义药物,其分子结构的
两端有一个修饰帽,从而增强其稳定性,该药抗病毒作用较强,是更昔
洛韦的1000倍,用于治疗巨细胞病毒性视网膜炎和艾滋病人并发巨细胞
视网膜炎。不良反应有虹膜炎、玻璃体炎,发生率为25%,用糖皮质激
素治疗可缓解或消除其炎性反应。
毒副作用急性毒性试验:小鼠LD50超过500毫克。在动物实验中,
常见免疫增强,表现为淋巴结增生、脾大、单核细胞浸润,长时间用药
更为明显。其它有ALT(谷丙氨酸转移酶)增高,白细胞和血小板减少,
血压下降,使用较大剂量时,延长凝血酶原时间。
近年来,反义药物在治疗某些肿瘤和病毒性感染方面,在临床试验
和应用中,取得令人满意的效果,但也存在一些问题,如最佳靶标的确
定比较困难。有一些疾病如肿瘤、心脑血管疾病、糖尿病等是多基因共
同作用的结果,因此难以找到关键性基因作为靶标,故必须与蛋白质组
学结合才能克服其不足。利用生物芯片技术有助于反义药物作用于靶标
的选择,其次,各种化学修饰能增强其作用,增加稳定性,减少毒副反
应。
希望以上内容对你有所帮助!
三、紧急请教:什么是反义寡核苷酸技术
反义寡核苷酸技术是一类经人工合成或构建的反义表达载体表达的寡核苷酸片段,长度多为15-30个核苷酸,通过碱基互补原理,干扰基因的解旋、复制、转录、mRNA的剪接加工乃至输出和翻译等各个环节,从而调节细胞的生长、分化等。
四、反义寡核苷酸和sirna有什么不同
四种核苷酸或脱氧核苷酸按照一定的排列顺序以3’,5’磷酸二酯键(phosphodiester linkage)相连形成的多聚核苷酸链或脱氧核苷酸(polydeoxynucleotides),称为核苷酸序列(也称为碱基序列)。脱氧核苷酸或核苷酸的连接具有严格的方向性,是前一核苷酸的3’-OH与下一位核苷酸的5’-位磷酸间形成3’,5’磷酸二酯键,构成一个没有分支的线性大分子。DNA的书写应从5’到3’
大多数的真核mRNA转录后在5\\'-端加一个7-甲基鸟苷,同时第一个核苷酸的C\\'2也是甲基化的,这种m7G ppp N m帽子结构具有促进核蛋白体与mRNA的结合、加速翻译起始速度的作用,同时可以增强mRNA的稳定性。
在真核mRNA的3\\'末端,有一多聚腺苷酸(poly A)结构,通常称为多聚A尾。一般由数十个至一百几十个腺苷酸连接而成。poly A是RNA生成后加上去的。poly A与mRNA从核内向胞质的转位及mRNA的稳定性有关。
DNA双链是反向的,复制时,两股链均作为模板,但新链的合成只能是5’→3’
引物提供3’-OH,与原料dNTP的5’-P形成磷酸二酯键,然后DNA聚合酶催化这一聚合反应的进行
sirna合成中,以U6启动子为模板,5′端引物与U6启动子5′端互补,3′端引物与U6启动子3′端互补并带siRNA正义链及9nt的环状结构,二次循环带反义链。
引物5’端可设计修饰,3’端是延伸开始,一般不可修饰,也不能形成二级结构。
小蚂蚁医药招商资讯网版权声明:以上内容作者已申请原创保护,未经允许不得转载,侵权必究!授权事宜、对本内容有异议或投诉,敬请联系网站管理员,我们将尽快回复您,谢谢合作!